შეგიძლიათ PCR პროდუქტის თანმიმდევრობა?

2024 ავტორი: Stanley Ellington | [email protected]. ბოლოს შეცვლილი: 2023-12-16 00:19

პირდაპირი თანმიმდევრობა დან PCR პროდუქტები . სავსებით შესაძლებელია პირდაპირ თანმიმდევრობა ა PCR პროდუქტი ფრაგმენტის წინასწარ კლონირების გარეშე. პირდაპირი PCR თანმიმდევრობა იშვიათად არის წარმატებული, თუ შენ გარკვეული დრო გაატარეთ ამის უზრუნველსაყოფად შენ არ ვარდებიან ერთი მრავალი ხაფანგიდან.

ამ გზით, რა არის PCR თანმიმდევრობა?

პირდაპირი თანმიმდევრობა დან PCR პროდუქტები. თქვენ უნდა წაშალოთ ყველა PCR პრაიმერები და არაინკორპორირებული ნუკლეოტიდები პროდუქტის მიღებამდე თანმიმდევრობით . თანმიმდევრობა იყენებს მხოლოდ ერთ პრაიმერის ნაცვლად გამოყენებული ორისა PCR . თუ ორივე პრაიმერი არ ამოიღეთ, მიიღებთ ორს თანმიმდევრობები ერთმანეთზე გადახურული, რომლებიც არ იკითხება.

ანალოგიურად, შემიძლია გამოვიყენო PCR პრაიმერები თანმიმდევრობისთვის? PCR პრაიმერები განკუთვნილია PCR გაძლიერება ამპლიკონის მისაღებად. თანმიმდევრობის პრაიმერები არიან გამოყენებული რომ თანმიმდევრობა დნმ-ის ფრაგმენტი და გამოავლინოს მისი დნმ თანმიმდევრობა იდენტიფიცირება. 4. ორი PCR პრაიმერები საჭიროა ა PCR რეაქცია (ჩვეულებრივ); მხოლოდ ერთი თანმიმდევრობის პრაიმერი ემატება ა თანმიმდევრობა რეაქცია.

ამის გათვალისწინებით, როგორ ამოწმებთ PCR პროდუქტებს?

გამოვლენა და ანალიზი PCR პროდუქტები . The პროდუქტი ა PCR უნდა იყოს განსაზღვრული სიგრძის დნმ-ის ფრაგმენტი ან ფრაგმენტები. მრავალი ტექნიკის გამოყენება შესაძლებელია გაძლიერებული თანმიმდევრობების გამოსავლენად (იხ. ცხრილი). ყველაზე მარტივი და ხშირად გამოყენებული ტექნიკაა ელექტროფორეზი PCR პროდუქტი აგაროზის გელზე EtBr-ით (ეთიდიუმის ბრომიდი).

რატომ არის საჭირო PCR პროდუქტების გაწმენდა თანმიმდევრობამდე?

განწმენდა დნმ-ის ა PCR რეაქცია ჩვეულებრივ ამისთვის აუცილებელია ქვედა ნაკადის გამოყენებას და ხელს უწყობს ფერმენტების, ნუკლეოტიდების, პრაიმერების და ბუფერული კომპონენტების მოცილებას.