Სარჩევი:

როგორ ჩასვათ გენი პლაზმიდში?
როგორ ჩასვათ გენი პლაზმიდში?

ვიდეო: როგორ ჩასვათ გენი პლაზმიდში?

ვიდეო: როგორ ჩასვათ გენი პლაზმიდში?
ვიდეო: HW5 inserting genes into plasmids 2024, ნოემბერი
Anonim

ძირითადი ნაბიჯებია:

  1. გაჭერით გახსენით პლაზმიდი და "პასტა" წელს გენი რა ეს პროცესი ეყრდნობა შემაკავებელ ფერმენტებს (რომლებიც ჭრიან დნმ-ს) და დნმ ლიგაზას (რომელიც უერთდება დნმ-ს).
  2. ჩასმა ის პლაზმიდში შევიდა ბაქტერიები.
  3. გაიზარდეთ ბევრი პლაზმიდი - ატარებს ბაქტერიებს და გამოიყენებს მათ როგორც "ქარხნებს" ცილის დასამზადებლად.

ასევე, როგორ შეიძლება გენის ჩასმა პლაზმიდურ GCSE-ში?

ეს არის ჩასმულია პლაზმიდში ლიგაზას ფერმენტების გამოყენებით. ის პლაზმიდი მიდის შევიდა ბაქტერიული უჯრედი. ტრანსგენური ბაქტერია მრავლდება, რის შედეგადაც in მილიონობით იდენტური ბაქტერია, რომელიც გამოიმუშავებს ადამიანის ინსულინს.

გარდა ამისა, როგორ ხდება გენის სუბკლონირება? ძირითადი ნაბიჯები სუბკლონირება თქვენ ათავისუფლებთ და ასუფთავებთ თქვენს ჩანართს მშობელი ვექტორიდან, ათავსებთ ამ ჩანართს მომზადებულ დანიშნულების ვექტორში, გარდაქმნით ამ ლიგაციის რეაქციას კომპეტენტურ ბაქტერიულ უჯრედებად. შემდეგ თქვენ ამოწმებთ ტრანსფორმირებულ უჯრედებს ჩასართავად.

ამის გათვალისწინებით, რა არის გენის კლონირების 4 ეტაპი?

კლასიკურ შეზღუდვის ფერმენტის მონელების და ლიგაციის კლონირების პროტოკოლებში, ნებისმიერი დნმ-ის ფრაგმენტის კლონირება არსებითად მოიცავს ოთხ საფეხურს:

  • საინტერესო დნმ-ის (ან სამიზნე დნმ-ის) იზოლაცია,
  • ლიგირება,
  • ტრანსფექცია (ან ტრანსფორმაცია) და.
  • სკრინინგის/შერჩევის პროცედურა.

როგორ აძლიერებ პლაზმიდს?

ექსპერიმენტული პროცედურა

  1. გაიარეთ PCR და გაასუფთავეთ PCR პროდუქტი: ჩაატარეთ PCR თქვენი ჩანართის დნმ-ის გასაძლიერებლად.
  2. დაიჯესტე შენი დნმ:
  3. იზოლირება თქვენი ჩანართი და ვექტორი გელის გამწმენდით:
  4. დააკავშირეთ თქვენი ჩანართი თქვენს ვექტორში:
  5. ტრანსფორმაცია:
  6. მზა პლაზმიდის იზოლირება:
  7. გადაამოწმეთ თქვენი პლაზმიდი თანმიმდევრობით:

გირჩევთ: