რა არის არასრული მონელება?

2024 ავტორი: Stanley Ellington | [email protected]. ბოლოს შეცვლილი: 2023-12-16 00:19

ან არასრული საჭმლის მომნელებელი სისტემას აქვს მხოლოდ ერთი გახსნა. საკვები მიდის იმავე ღიობაში, სადაც ნარჩენები გამოდის. თითქოს შენი ანუსი ისეთივე ხვრელია, როგორც შენი პირი! წყალი შედის და სპეციალური უჯრედები, სახელწოდებით choanocytes, ფილტრავს საკვების ნაწილაკებს.

ამის გათვალისწინებით, რატომ ხდება არასრული მონელება?

არასრული მონელება ეს არის პრობლემა, რომელიც ხშირად გვხვდება შემაკავებელი ენდონუკლეაზების გამოყენებისას. არასრული მონელება შეიძლება მოხდეს როდესაც გამოიყენება ძალიან ბევრი ან ძალიან ცოტა ფერმენტი. დნმ-ის ნიმუშში დამაბინძურებლების არსებობამ შეიძლება დათრგუნოს ფერმენტები, რაც ასევე იწვევს არასრული მონელება.

შეიძლება ასევე იკითხოთ, რამდენ ხანს შეგიძლიათ დატოვოთ შეზღუდვა დაიჯესტი? *Pro-Tip* გამოყენებისა და რეაქციაში დნმ-ის რაოდენობის მიხედვით, ინკუბაციის დრო შეუძლია მერყეობს 45 წუთიდან ღამემდე. დიაგნოსტიკისთვის ამუშავებს 1-2 საათი არის ხშირად საკმარისი. ამისთვის ამუშავებს >1 მკგ დნმ-ით, რომელიც გამოიყენება კლონირებისთვის, ის არის გირჩევთ რომ შენ ინელებ მინიმუმ 4 საათის განმავლობაში.

ამ გზით, რა არის დნმ-ის სრული მონელება?

შეზღუდვა საჭმლის მონელება არის ჭრის პროცესი დნმ მოლეკულები პატარა ნაჭრებად სპეციალური ფერმენტებით, რომელსაც ეწოდება შეზღუდვის ენდონუკლეაზები (ზოგჯერ უბრალოდ შეზღუდვის ფერმენტებს ან RE-ებს უწოდებენ).

როგორ აკეთებთ თანმიმდევრულ მონელებას?

პროტოკოლი თანმიმდევრული დნმ საჭმლის მონელება რეაქციის ინკუბაცია ზე საჭმლის მონელება ტემპერატურა (ჩვეულებრივ 37°C) 1 საათის განმავლობაში. შეაჩერე საჭმლის მონელება სითბოს ინაქტივაციით (65°C 15 წუთის განმავლობაში) ან 10 მმ საბოლოო კონცენტრაციის EDTA-ს დამატებით. აღადგინეთ დნმ გამწმენდი ნაკრების გამოყენებით: ხელახლა შეაჩერეთ და განზავეთ დნმ 1 მკგ/მლ-მდე.