ვიდეო: რა შეზღუდვის ფერმენტები გამოიყენება ბუნებაში?
2024 ავტორი: Stanley Ellington | [email protected]. ბოლოს შეცვლილი: 2023-12-16 00:19
შეზღუდვის ფერმენტი, რომელსაც ასევე უწოდებენ შეზღუდვის ენდონუკლეაზას, პროტეინს, რომელსაც წარმოქმნის ბაქტერიები რომ ჭრის დნმ მოლეკულის გასწვრივ კონკრეტულ ადგილებში. ბაქტერიულში უჯრედი რესტრიქციული ფერმენტები იშლება უცხო დნმ , რითაც აღმოფხვრის ინფიცირებულ ორგანიზმებს.
აქედან გამომდინარე, რა როლი აქვს შემაკავებელ ფერმენტებს ბუნებაში?
ა შეზღუდვის ფერმენტი არის ცილა, რომელიც ცნობს სპეციფიკურ, მოკლე ნუკლეოტიდურ თანმიმდევრობას და წყვეტს დნმ-ს მხოლოდ იმ კონკრეტულ ადგილას, რომელიც ცნობილია როგორც შეზღუდვა საიტი ან სამიზნე თანმიმდევრობა. ცოცხალ ბაქტერიებში, შეზღუდვის ფერმენტების ფუნქციონირება დაიცვას უჯრედი ვირუსული ბაქტერიოფაგების შეჭრისგან.
ანალოგიურად, როგორ არის დასახელებული შეზღუდვის ფერმენტები? შემაკავებელი ფერმენტები დასახელებულია ორგანიზმის საფუძველზე, რომელშიც ისინი აღმოაჩინეს. მაგალითად, ფერმენტი Hind III იზოლირებული იყო Haemophilus influenzae– სგან, შტამი Rd. სახელის პირველი სამი ასო დახრილია, რადგან ისინი ასახელებენ გვარს და სახეობას სახელები ორგანიზმის.
ანალოგიურად შეიძლება ვიკითხოთ, სად გვხვდება ბუნებაში შემზღუდველი ფერმენტები?
დნმ -ის მოჭრა, ყველაფერი შეზღუდვის ფერმენტები გააკეთეთ ორი ჭრილობა, ერთხელ დნმ-ის ორმაგი სპირალის თითოეული შაქრის-ფოსფატის ხერხემლის (ანუ თითოეული ჯაჭვის) მეშვეობით. ესენი ფერმენტები არიან ნაპოვნია ბაქტერიებსა და არქეებში და უზრუნველყოფს დამცავ მექანიზმს შემოჭრილი ვირუსებისგან.
რა არის შეზღუდვის ფერმენტების ევოლუციური წარმოშობა და რა არის მათი თავდაპირველი დანიშნულება?
შეზღუდვის ენდონუკლეაზები (REases) იცავს ბაქტერიებს უცხო დნმ-ის შეჭრისგან და დაჯილდოებულია თანმიმდევრობის დახვეწილი სპეციფიკით. REases აქვს წარმოიშვა წინაპართა პროტეინებიდან და განვითარდა ახალი თანმიმდევრობის სპეციფიკა გენეტიკური რეკომბინაციის, გენის დუბლირების, რეპლიკაციის სრიალისა და ტრანსპოზიციური მოვლენების გზით.
გირჩევთ:
რატომ არის მნიშვნელოვანი შეზღუდვის ფერმენტები მოლეკულურ ბიოლოგიაში?
შეზღუდვის ფერმენტები არის ბაქტერიებისგან იზოლირებული ფერმენტები, რომლებიც აღიარებენ დნმ -ის სპეციფიკურ თანმიმდევრობას და შემდეგ წყვეტენ დნმ -ს ფრაგმენტების წარმოსაქმნელად, რომელსაც ეწოდება შეზღუდვის ფრაგმენტები. შეზღუდვის ფერმენტები ძალიან მნიშვნელოვან როლს ასრულებენ რეკომბინანტული დნმ -ის მოლეკულების მშენებლობაში, როგორც ეს ხდება გენის კლონირების ექსპერიმენტებში
აქვს თუ არა ყველა ბაქტერიას შეზღუდვის ფერმენტები?
შემაკავებელი ფერმენტები გვხვდება ბაქტერიებში (და სხვა პროკარიოტებში). ისინი ცნობენ და უკავშირდებიან დნმ-ის კონკრეტულ თანმიმდევრობას, რომელსაც ეწოდება შეზღუდვის ადგილები
რა არის სხვადასხვა ტიპის შეზღუდვის ფერმენტები?
ტრადიციულად, აღიარებულია შემაკავებელი ფერმენტების ოთხი ტიპი, დასახელებული I, II, III და IV, რომლებიც ძირითადად განსხვავდებიან სტრუქტურით, დაშლის ადგილით, სპეციფიკურობითა და კოფაქტორებით
როგორ გამოიყენება შემაკავებელი ფერმენტები და ლიგაზა ბიოტექნოლოგიაში?
შეზღუდვის ფერმენტები არის დნმ-ს ჭრის ფერმენტები. დნმ ლიგაზა არის დნმ-ის შემაერთებელი ფერმენტი. თუ დნმ-ის ორ ნაწილს აქვს შესატყვისი ბოლოები, ლიგაზას შეუძლია დააკავშიროს ისინი და შექმნას დნმ-ის ერთი, განუწყვეტელი მოლეკულა. დნმ-ის კლონირებისას შემაკავებელი ფერმენტები და დნმ ლიგაზა გამოიყენება გენების და დნმ-ის სხვა ნაწილების პლაზმიდებში ჩასართავად
როგორ გამოიყენება შემაკავებელი ფერმენტები გელის ელექტროფორეზის ჩატარებისას?
1 პასუხი. დნმ-ის, რნმ-ის ან პლაზმიდის მოჭრა შეზღუდვის ადგილებში (როგორიცაა EcoRI, BamHI, hindIII და BglII), რათა შეიქმნას უფრო მცირე გენეტიკური ფრაგმენტები, რომლებიც შეიძლება განცალკევდეს და ამით დახასიათდეს გელის ელექტროფორეზის გამოყენებით