როგორ გამოიყენება შემაკავებელი ფერმენტები გელის ელექტროფორეზის ჩატარებისას?
როგორ გამოიყენება შემაკავებელი ფერმენტები გელის ელექტროფორეზის ჩატარებისას?

ვიდეო: როგორ გამოიყენება შემაკავებელი ფერმენტები გელის ელექტროფორეზის ჩატარებისას?

ვიდეო: როგორ გამოიყენება შემაკავებელი ფერმენტები გელის ელექტროფორეზის ჩატარებისას?
ვიდეო: Gel Electrophoresis 2024, დეკემბერი
Anonim

1 პასუხი. დნმ-ის, რნმ-ის ან პლაზმიდის დასაჭრელად შეზღუდვა საიტები (როგორიცაა EcoRI, BamHI, hindIII და BglII) უფრო მცირე გენეტიკური ფრაგმენტების შესაქმნელად, რომლებიც შეიძლება განცალკევდეს და ამგვარად დახასიათდეს გამოყენებით გელის ელექტროფორეზი.

ანალოგიურად შეიძლება ვიკითხოთ, რა არის შემზღუდველი ფერმენტების როლი?

ა შეზღუდვის ფერმენტი არის ცილა, რომელიც ცნობს სპეციფიკურ, მოკლე ნუკლეოტიდურ თანმიმდევრობას და წყვეტს დნმ-ს მხოლოდ იმ კონკრეტულ ადგილას, რომელიც ცნობილია როგორც შეზღუდვა საიტი ან სამიზნე თანმიმდევრობა. ცოცხალ ბაქტერიებში, შეზღუდვის ფერმენტების ფუნქციონირება უჯრედის დასაცავად ვირუსული ბაქტერიოფაგებისგან.

ასევე, როგორ იცით რომელი შემაკავებელი ფერმენტი გამოიყენოთ? შეზღუდვის ფერმენტების არჩევისას, თქვენ გსურთ აირჩიოთ ფერმენტები, რომლებიც:

  1. გვერდით შემოახვიეთ ჩანართს, მაგრამ არ გაჭრათ ჩანართში.
  2. იმყოფებით სასურველ ადგილას თქვენს მიმღებ პლაზმიდში (ჩვეულებრივ, მრავალჯერადი კლონირების ადგილზე (MCS)), მაგრამ არ გაჭრათ პლაზმიდის სხვაგან.

ამის გარდა, როგორ გამოიყენება შემაკავებელი ფერმენტები კვლევაში?

ლაბორატორიაში, შეზღუდვის ფერმენტები (ან შეზღუდვის ენდონუკლეაზები ) არიან გამოყენებული დნმ-ის დაჭრა პატარა ფრაგმენტებად. ჭრილობები ყოველთვის კეთდება სპეციფიკურ ნუკლეოტიდურ თანმიმდევრობებზე. Განსხვავებული შეზღუდვის ფერმენტები დნმ-ის სხვადასხვა თანმიმდევრობის ამოცნობა და ამოჭრა.

რა როლი აქვს გელის ელექტროფორეზის?

გელის ელექტროფორეზი არის ტექნიკა, რომელიც გამოიყენება დნმ-ის ფრაგმენტების ზომის მიხედვით გამოყოფისთვის. დნმ-ის ნიმუშები იტვირთება ჭებში (ჩაღრმავები) a-ის ერთ ბოლოში ლარი და ელექტრული დენი გამოიყენება მათში გასასვლელად ლარი . დნმ-ის ფრაგმენტები უარყოფითად არის დამუხტული, ამიტომ ისინი მოძრაობენ დადებითი ელექტროდისკენ.

გირჩევთ: