როგორ არჩევთ კლონებს?

2024 ავტორი: Stanley Ellington | [email protected]. ბოლოს შეცვლილი: 2023-12-16 00:19

Როდესაც არჩევა ა კლონი დარწმუნებული იყავით, რომ ფესვები ძლიერია, თეთრი და მოუთმენლად ამოწეული ზრდის საშუალებისგან. თუ ფესვები ყავისფერია და გახეხილია, ან სხვაგვარად უმოქმედო ჩანს, დააბრუნეთ და მოძებნეთ უკეთესი.

გარდა ამისა, როგორ ხდება ერთი უჯრედის კლონირება?

1. დათვალეთ უჯრედები, რათა მოათავსოთ ~16000 უჯრედი 96 ჭაბურღილის ფირფიტის პირველ ჭაბურღილში (A1), რომელიც შეიცავს 200 μL საშუალოს.
2. ამოიღეთ 100 μL A1 შემცველი უჯრედებიდან და შეურიეთ B1-ს, პიპეტით ზევით-ქვევით 3-ჯერ, რომ კარგად აურიოთ 100 μL-ის ამოღებამდე და შერევამდე C1-თან და ა.შ.

ასევე, როგორ ირჩევთ ძუძუმწოვრების უჯრედების კოლონიას? მოათავსეთ ფირფიტა მიკროსკოპის ქვეშ, რათა აირჩიოთ არადიფერენცირებული ჯანსაღი კოლონიები . აირჩიე კოლონიები P-20 პიპეტის გამოყენებით დაყენებულია 10 ul. ფრთხილად აირჩიე ა კოლონია დაშლის გარეშე კოლონია მარტოობაში უჯრედები და გადაიტანეთ 96 ჭაბურღილში ტრიპსინთან ერთად. პიპეტით ზევით-ქვევით რამდენჯერმე დასაშლელად კოლონია.

შესაბამისად, როგორ იყენებთ კლონის ცილინდრს?

გამოყენება სტერილური საშუალო პინცეპსი, აიღეთ ა კლონირების ცილინდრი . ნაზად დააჭირეთ ბრტყელ ძირს ცილინდრი შედგით გლუვ სილიკონის საცხში და ამოიღეთ უეცარი ვერტიკალური მოძრაობით. თუ სწორად გაკეთდა, ეს მისცემს ცხიმის თანაბრად განაწილებას ქვედა ნაწილზე ცილინდრი . Დააყენე ცილინდრი კოლონიის თავზე.

როგორ ირჩევთ კოლონიებს სტაბილური უჯრედული ხაზებისთვის?

სტაბილური უჯრედული ხაზების გენერირების პროტოკოლი მოითხოვს რამდენიმე ნაბიჯს, როგორც ეს ნაჩვენებია ქვემოთ:

1. შექმენით მკვლელობის მრუდი, რათა დადგინდეს ოპტიმალური შერჩევის ანტიბიოტიკის კონცენტრაცია.
2. უჯრედების ტრანსფექტირება სასურველი პლაზმიდური კონსტრუქციით
3. აირჩიეთ და გააფართოვეთ სტაბილური პოლიკლონური კოლონიები.
4. ცალკეული კლონების იდენტიფიცირება შეზღუდული განზავებისა და გაფართოებით.