რა მოხდება, თუ თქვენ დაამატებთ ძალიან ბევრ შემაკავებელ ფერმენტს?
რა მოხდება, თუ თქვენ დაამატებთ ძალიან ბევრ შემაკავებელ ფერმენტს?

ვიდეო: რა მოხდება, თუ თქვენ დაამატებთ ძალიან ბევრ შემაკავებელ ფერმენტს?

ვიდეო: რა მოხდება, თუ თქვენ დაამატებთ ძალიან ბევრ შემაკავებელ ფერმენტს?
ვიდეო: Reversible Inhibitors 2024, მაისი
Anonim

შეიძლება მოხდეს არასრული მონელება როდესაც ძალიან ბევრი ან ძალიან პატარა ფერმენტი გამოიყენება. The დამაბინძურებლების არსებობა The დნმ ნიმუში შეუძლია დათრგუნავს ფერმენტები , ასევე იწვევს არასრულ მონელებას. Ზოგიერთი შეზღუდვის ფერმენტები მოითხოვს კოფაქტორებს სრული აქტივობისთვის.

გარდა ამისა, რატომ ემატება შემაკავებელი ფერმენტები ბოლოს?

The შეზღუდვის ფერმენტი ჩვეულებრივ არის ბოლო კომპონენტი დაემატა რეაქციაზე, რათა ის არ იყოს ექსტრემალურ პირობებში. აწყობილი რეაქცია უნდა იყოს შერეული შემდეგ ფერმენტი დამატება. შეურიეთ ყველა შემცველი ხსნარი შეზღუდვის ფერმენტები ნაზად თავიდან ასაცილებლად ფერმენტი ინაქტივაცია.

გარდა ამისა, როგორ შეიძლება გაუმჯობესდეს შემზღუდველი ფერმენტის მონელება? გამოიყენეთ არაუმეტეს რეკომენდებულზე ფერმენტი თანხა (მაგ., 10 ერთეული ფერმენტი დნმ-ის მიკროგრამზე). შეამცირეთ რაოდენობა ფერმენტი რეაქციაში, საჭიროების შემთხვევაში. თავიდან აიცილოთ მისი ხანგრძლივი ინკუბაცია საჭმლის მონელება რეაქცია. გამოიყენეთ რეკომენდებული რეაქციის ბუფერი.

ისიც იცოდე, რატომ არ ჭრის შეზღუდვის ფერმენტი?

მოსახსნელი დნმ-ის მომზადება უნდა არ იყოს დამაბინძურებლებისგან, როგორიცაა ფენოლი, ქლოროფორმი, ალკოჰოლი, EDTA, სარეცხი საშუალებები ან ჭარბი მარილები, რაც ხელს უშლის შეზღუდვის ფერმენტი აქტივობა. თუ არსებობს ინჰიბიტორი (ხშირად მარილი, EDTA ან ფენოლი), საკონტროლო დნმ იქნება არ მოჭრილი შერევის შემდეგ.

რატომ შეიძლება გამოიწვიოს ფერმენტის რაოდენობამ ვარსკვლავის აქტივობა?

ვარსკვლავის აქტივობა არის რელაქსაცია ან შეზღუდვის სპეციფიკის შეცვლა ფერმენტი შუამავლობით დნმ-ის დაშლა რომ შეუძლია წარმოიქმნება რეაქციის პირობებში, რომლებიც მნიშვნელოვნად განსხვავდება იმ ოპტიმალურისგან ფერმენტი . ვარსკვლავის აქტივობას შეუძლია ხდება Mg-ის არსებობის გამო2+, როგორც არის ჩანს HindIII-ში, მაგალითად.

გირჩევთ: