რისთვის გამოიყენება საპირისპირო ტრანსკრიფციის PCR?

2024 ავტორი: Stanley Ellington | [email protected]. ბოლოს შეცვლილი: 2023-12-16 00:19

RT - PCR ( საპირისპირო ტრანსკრიპტაზა PCR ) RT - PCR არის გამოყენებული კვლევით ლაბორატორიებში გენის ექსპრესიის შესასწავლად, მაგალითად, ექსპერიმენტებში, რათა განასხვავონ ეგზონები ინტრონებისაგან და შეიძლება იყოს გამოყენებული კლინიკურად გენეტიკური დაავადებების დიაგნოსტიკისა და წამლის თერაპიის მონიტორინგისთვის.

ამის გათვალისწინებით, რა არის საჭირო საპირისპირო ტრანსკრიფციისთვის?

წამოიწყოს საპირისპირო ტრანსკრიფცია , საპირისპირო ტრანსკრიპტაზებს ესაჭიროებათ მოკლე დნმ-ის ოლიგონუკლეოტიდი, რომელსაც ეწოდება პრაიმერი, რათა დაუკავშირდეს მის დამატებით თანმიმდევრობებს რნმ-ის შაბლონზე და გახდეს საწყისი წერტილი ახალი ჯაჭვის სინთეზისთვის.

გარდა ამისა, რატომ არის მნიშვნელოვანი cDNA-ს გამოყენება PCR-სთვის? cDNA აქვს საკუთარი მნიშვნელობა in Პოლიმერიზაციის ჯაჭვური რეაქციის ( PCR ) ტექნიკა. cDNA ეს არის ფერმენტების შებრუნებული ტრანსკრიპციის შედეგი, რომელსაც უწოდებენ უკუ ტრანსკრიპტაზებს. ახლა, როგორც ზუსტი ასლი გენომიკური დნმ , ეს cDNA შეუძლია ემსახუროს დანიშნულება შაბლონის დნმ ინ ვიტრო ამპლიფიკაციისა და შემდგომი ანალიზებისთვის.

ამ გზით, რა განსხვავებაა რეალურ დროში PCR-სა და საპირისპირო ტრანსკრიპტაზას PCR-ს შორის?

RT - PCR გამოიყენება დნმ-ის კოდის შებრუნებული ტრანსკრიფციის გასაძლიერებლად; QPCR ზომავს გაძლიერებას. 3. RT - PCR არის გამაძლიერებელი, ხოლო qPCR არის რაოდენობრივი.

არის cDNA ორჯაჭვიანი?

რნმ -ისგან განსხვავებით, დნმ -ის მოლეკულების ადვილად კლონირება შესაძლებელია (ამას ეწოდება cDNA კლონები ') cDNA ორმაგი - გაჭედილი და უკავშირდება ვექტორულ დნმ -ს. დნმ-ის თანმიმდევრობის ანალიზი ბევრად უფრო ადვილია, ვიდრე რნმ-ის, შესაბამისად, cDNA არის აუცილებელი ფორმა რნმ -ის ანალიზში, განსაკუთრებით ევკარიოტული mRNA.